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    Nicoletta POTENZA

    Insegnamento di LABORATORIO DI BIOLOGIA MOLECOLARE

    Corso di laurea in SCIENZE BIOLOGICHE

    SSD: BIO/11

    CFU: 1,00

    ORE PER UNITÀ DIDATTICA: 8,00

    Periodo di Erogazione: Secondo Semestre

    Italiano

    Lingua di insegnamento

    ITALIANO

    Contenuti

    Il corso si integra con i moduli di Laboratorio di Genetica e di Microbiologia per un comune obiettivo simulante parte di un progetto di ricerca: "Isolamento e clonaggio di un gene umano". Il Laboratorio di Biologia Molecolare si occuperà in particolare di illustrare e far praticare l'isolamento di un gene mediante la PCR su genoma umano (purificato dal corso di Laboratorio di Genetica) e clonaggio in un vettore plasmidico che sarà utilizzato per trasformare batteri competenti (nel corso di Laboratorio di Microbiologia).

    Testi di riferimento

    1-DNA ricombinante-Watson, Caudy et al- Zanichelli
    2-Dispense e slide fornite dal docente

    Obiettivi formativi

    Al termine del corso lo studente avrà acquisito:
    -Conoscenza delle basi teoriche per isolare e clonare rapidamente un gene umano
    -Pratica di alcune metodiche di base della Biologia Molecolare (PCR, digestione enzimatica, ligasi in un vettore)

    Prerequisiti

    Conoscenze e abilità fornite dal corso di Biologia Molecolare

    Metodologie didattiche

    Due lezioni, ciascuna di 4 ore, organizzata come segue:
    30 min di introduzione teorica con slide power point; 3.5 ore di esercitazione pratica di laboratorio.

    Frequenza obbligatoria.

    Metodi di valutazione

    Prova orale.
    La prova orale si prefigge l'obiettivo di valutare la comprensione delle metodiche praticate e le loro possibili applicazioni.

    Altre informazioni

    Lo studente sarà supportato nello studio dalle slide e dispense pubblicate sul sito web del Dipartimento.
    Il professore sarà disponibile negli orari di ricevimento e su richiesta via email.

    Programma del corso

    PCR per isolare un gene umano e clonaggio in un vettore ricombinante: basi teoriche.
    In laboratorio:
    Allestimento reazione di PCR su DNA genomico umano. Corsa su gel di agarosio e purificazione del prodotto di amplificazione.
    Digestione enzimatica del prodotto di PCR e del vettore di clonaggio. Allestimento reazione di ligasi.

    English

    Teaching language

    Italian

    Contents

    This course is integrated with Laboratory of Genetics and Laboratory of Microbiology within a typical topic of a research project: "Isolation and cloning of a human gene". In particular, the Laboratory of Molecular Biology will show theoretical principles and practice of isolation of a gene by PCR on human DNA (purified by Laboratory of Genetics) and cloning in a plasmid vector that will be used for bacteria transformation (during the Laboratory of Microbiology)

    Textbook and course materials

    1-DNA ricombinante-Watson, Caudy et al- Zanichelli
    2-Handouts and slides for laboratory experiences

    Course objectives

    Main aims of the course:
    -Knowledge of theoretical principles for quick isolation and cloning of a human gene.
    -Practice with some molecular biology techniques commonly used in a wet laboratory (PCR, digestion with restriction enzymes, ligation in a vector)

    Prerequisites

    Knowledge and skills provided by the course of Molecular Biology

    Teaching methods

    2 lessons, each consisting in 4 hours, organized as follows:
    30 min of theoretical lessons with power point slides; 3.5hrs of
    laboratory experiences

    Attendance to laboratory experiences are compulsory.

    Evaluation methods

    Oral examination.
    The oral examination will ascertain the comprehension of the methodics performed in laboratory and their potential applications

    Other information

    The student will be supported in his/her own studies by slides and handouts published on the web site of Department.

    The professor will be available for students as indicated, and upon request via email.

    Course Syllabus

    Isolation of a human gene by PCR and cloning in a recombinant vector: theory.
    Laboratory experience:
    Set up of a PCR reaction on human DNA. Gel electorphoresis and purification of the PCR product. Enzymatic digestion of the PCR product and plasmid. Set up of ligase reaction.

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